Coloracion GRAM.

La coloración o tincion Gram es un tipo de tincion diferencial, la cual se usa mucho en la bacteriología.Esta tecnica fue desarrollada por Cristhian Gram.

Gracias a la propiedades y características de la la pared celular delas bacterias, estas se van a poder diferenciar en dos grandes grupos  con la ayuda de la coloración Gram , siendo en Gram + y Gram - .

 Protocolo :

1 Realizar un extendido de la muestra a colorear en un porta objeto

2 Fijar el extendido a el portaobjeto con la ayuda de un mechero o dejarlo secar 

3 Agrgar Cristal violeta sobre el extendido ( colorante )

4 Retirar el cristal violeta y agregar lugol (mordiente)

5 Rettir lugar y agregar alcohol acetona  ( decolorante)

6 Lavar con agua destilada

7 Agregar safranina ( contrastes)

NOTA : 

Antes de realizar la coloracion Gram, que los colorantes no se encuentren precipitados ni vencidos

Los tiempo se tendrán en cuenta con los reactivos que se trabaje.

 

  Fundamento :  

Una vez estando fijadala muestra en el portaobjeto, se le agregara el Cristal Violeta, el cual teñira todas las células procariotas, con la ayuda del lugol (mordiente) se formara un complejo CV-lugol el cual solo se quedara unido en la pared bacteriana de las Gram + (Peptidoglicano) mas no en las Gram - ya que ella presentan membrana externa, luego con la ayuda del decolorante,alcohol acetona, se podrá eliminar el exceso de CV mas no el complejo CV-Yodo, en cual se formo en las Gram+ , por ultimo paso es la agregacion de safranina, la cual servirá como colorante de contrastete, ya que este colorante teñira aquellas celulas que no han podido formar el complejo CV-Yodo, llamandose a estas Gram -.

despues de haber realizado la coloracion, se podra observar la muestra coloreada a miscroscopio optico a 1000x para asi poder diferenciar las bacterias Gram + y Gram  -